Introducción: Acinetobacter spp. incrementa su resistencia antimicrobiana  en la actualidad con múltiples mecanismos de resistencia. Objetivos: Evaluar la susceptibilidad a betalactámicos de aislamientos clínicos de Acinetobacter spp., determinar la producción de metalobetalactamasa y los genes blaOXA, blaIMP, blaVIM y blaNDM-1 en las cepas resistentes  carbapenémicos. Métodos: Se realizó un estudio descriptivo en 500 aislamientos de Acinetobacter spp. procedentes de 30 hospitales del país, aislados durante el período 2010-2012. Se  determinaron las especies mediante pruebas bioquímicas. Se evaluó la susceptibilidad a betalactámicos (por el método de E-test según las recomendaciones del CLSI. La producción de Metalobetalactamasas  se evaluó mediante pruebas fenotípicas y se aplicó la PCR múltiple para la detección de los genes blaOXA, blaIMP, blaVIM y blaNDM-1. Se realizó secuenciación  de ADN de una cepa positiva al gen blaNDM-1 para confirmar especie y  el gen de resistencia propiamente dicho. Resultados: El complejo Acinetobacter baumannii-calcoaceticus  (CAbc) fue el mas prevalente (96.4%) mientras otras especies se detectaron en baja frecuencia (A. junii, 1.6%; A. lwoffii, 1%, A. haemolyticus, 0.8 y A. soli, 0.2%). El porcentaje de resistencia a betalactámicos fue de: cefalosporinas (34-61%), betalactámicos con inhibidores de betalactamasas (49-50%) y carbapenémicos (42-44%). Aunque no se detectaron los genes blaIMP y blaVIM, el gen  blaNDM-1 se identificó en una cepa de A. soli, especie que fue confirmada por secuenciación parcial de los genes 16SrRNA, rpoB, rpoB-rpoC y regiones intergénicas rpoL-rpoB y gyrB. Todos los CAbc portaron el gen blaOXA-51. Entre los aislamientos resistentes a carbapenémicos el 75% compartió diferentes genes  blaOXA (OXA-23, 73%; OXA-24, 18%; OXA-58, 3%; y la combinación de OXA-23 and OXA-24, 3%). Conclusiones: La resistencia a cefalosporinas y carbapenémicos en Acinetobacter spp. constituye un desafío terapéutico en hospitales cubanos junto a la emergencia de la NDM-1 en una especie inusual causando infección  en el humano (A. soli).  El rol de las carbapenemasas tipo OXA en aislamientos clínicos de Acinetobacter spp. es evidente en Cuba.